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细菌内毒素单位大小与实验结果的关系
2017-07-19 15:48:19
湛江博康海洋生物有限公司
应部分细菌内毒素检查工作同仁提出的：“选择每支装量为0.50、0.25、 0.125EU/ml这种小单位的细菌内毒素工作品直接用做实验，是否会影响实验结果”的问题，概述一下我们对这一问题的理解，以供参考！
中国药典二部附录《细菌内毒素检查法》规定“细菌内毒素工作品是用于鲎试剂灵敏度复核和实验中的阳性（含样品阳性）对照。”可见细菌内毒素本身的纯度与其生物活性的精确度，是直接影响实验结果可靠性的物质。在国际上（如美国、英国和日本）使用的细菌内毒素工作品，其分装生产单位一般在100～500ng/瓶。活性单位相当于500～2500EU/瓶。近年来，中国药品生物制品检定所分发的细菌内毒素工作品一般在100～300EU/瓶。为工作的方便，我国的鲎试剂生产供应商提供2～10EU/ml的细菌内毒素对照品，但这种小单位的细菌内毒素较少生产使用。
细菌内毒素是由O特异链、核心多糖和类脂A三部分组成，其分子量大小因菌株来源不同而异，分子量一般在5000-25000之间。无论那种菌属的脂多糖，都是由己糖、氨基己糖、戊糖、半乳糖、庚糖和磷酸己醇胺等单糖以共价键构成的亲水性低聚糖链，并通过酰胺键以疏水性的脂肪酸连接的复合分子。特别是类脂A可从O-特异链和核心多糖中游离出来自身凝聚成多聚体不溶于水。同时低聚糖链中由于脂酰葡萄糖胺的酰胺键容易被水解。所以，提纯的细菌内毒素实际上是不稳定的。
其次，这种细菌内毒素在分装生产过程中，因内毒素活性单位稀释过小，其生产分装误差更大，在冷冻干燥后，取出封口的过程中易受潮，导致水分的增加影响内毒素工作品的稳定性，也必然存在支间差异。同时在使用时由于内毒素活性单位小不用稀释，导致辅型剂介子浓度太高，影响试验结果。
严格的说，把细菌内毒素工作品分装生产成≤1EU/瓶直接用做实验是不妥的，可能影响实验结果的可靠性。
综上所述，我们建议在实施细菌内毒素检查时，不要选用活性<1.0EU/支的细菌内毒素工作品，以避免鲎试剂实验假阳性或假阴性结果的发生……
（本文完）
本文作者：莫水晶
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