口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗的细菌内毒素检查法

一、试验目的：
建立口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗的细菌内毒素检查方法，按现行《中国兽药典》一部附录“细菌内毒素检查法”进行试验并判定结果。
二、试剂和仪器：
鲎试剂（灵敏度：0.25EU/ml；规格：0.1ml，湛江博康海洋生物有限公司）
细菌内毒素标准品（150601-202191，90EU/支，中国食品药品检定研究院提供）
细菌内毒素检查用水（规格：5ml，湛江博康海洋生物有限公司）
口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗（规格：100ml/瓶）
仪器：细菌内毒素分析仪，型号：BET-24A-48，生产厂家：湛江博康海洋生物有限公司
三、实验： 
1、标准
该产品我们检索、查询到相关质量标准《中国兽药典》“口蹄疫A型灭活疫苗（AF/72型）”，每头份疫苗中内毒素含量应不超过50EU。
2、供试品前处理
乳剂仍然很稳定不破乳，因光源无法穿透乳剂，我们只能选择细菌内毒素凝胶法进行试验。
3、最大有效稀释倍数的确定
口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗肌肉注射，每头牛注射1ml。因此该产品限值(L)为50EU/ml。
按现行《中国兽药典》一部附录“细菌内毒素检查法”计算最大有效稀释倍数MVD：
MVD=L/λ=50÷0.25=200倍
4、试验
按现行《中国兽药典》一部附录“细菌内毒素检查法”进行试验,进行了100倍、200倍和400倍稀释液3次试验，未发现干扰。
四、结论：
口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗细菌内毒素检查：取本品，依据现行《中国兽药典》一部附录“细菌内毒素检查法”进行试验，选用样品200倍稀释液作为检测浓度，鲎试剂灵敏度：0.25EU/ml。