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肝素钠盐水稀释液放置不同条件下细菌内毒素污染的调查
Date: 2017-07-20 08:42:11
作者：李清 李涛 陈雅 李飞娥 刘道燕
关键词：肝素钠；等渗盐水；细菌内毒素
中图法分类号： R954 文献标识码： B 文章编号：1000-5404(2000)12-1185-01
随着静脉留置套管针在临床的广泛使用，采用肝素钠盐水稀释液封管已成为常规，其配制方法是将肝素钠12500U/支加入0.9％等渗盐水100 ml中，每次抽取2～5 ml（125U/ml）［1］封管。据调查，临床上少数科室由于每日只有3～5个病人封管，护理人员为了节约经费，将稀释液放置于冰箱中保存使用2～3d或更长的时间。为了进一步探讨该稀释液使用中的安全性，本实验将肝素钠盐水稀释液配制后，通过不同的穿刺抽液次数、置于不同温度中，于不同的时间用鲎试剂法对细菌内毒素（热原）进行检测，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 试剂与器材
鲎试剂(湛江海洋生物制品厂，0.5EU/支，批号991202)；鲎试剂溶解水(2ml/支，批号000110）；细菌内毒素工作标准品；肝素钠（上海生物化学制药厂，12500U/支批号001006）；等渗盐水100 ml（本院药剂科生产，批号000512）。电热恒温水浴箱，B-D 5ml一次性空针（6号针头）。
1.2 方法
1.2.1样本分组及采样时间 配制125U/ml浓度的肝素钠盐水稀释液120瓶，根据采样时间不分为12、24、48、72 h 4组，每组30瓶。4组中再根据放置温度（4℃、25℃）分为2个亚组，每亚组各15瓶，以观察不同的温度对稀释液产生细菌内毒素的影响。亚组15瓶中再根据穿刺抽液次数不同分为3个观察组（5、10、20次组）各5瓶，以观察不同的抽液次数对产生细菌内毒素的影响。
1.2.2 细菌内毒素检测 每瓶稀释液检测时，均取鲎试剂4支，分别用0.1ml鲎试剂溶解水溶解，其中2支分别加入0.1 ml待测液作为试验管，另2支作阳性及阴性对照，阳性对照加内毒素工作标准品溶液0.1 ml，阴性对照加细菌内毒素检查用水0.1 ml。将试管溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入(37±1) ℃水浴箱中，保温(60±2) min，观察结果。
1.2.3 判断标准 将试管从水浴箱中轻轻取出，缓缓倒转180 °时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性（＋）；凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性（－）。试验管两管均为（－），判定为无内毒素产生；如两管均为（＋），则判定为内毒素产生；如两管中1管为（－），1管为（＋），按上述方法另取4管复试，如4管中有1管为（＋），即判定为有内毒素产生。
1.3 统计学方法
采用χ2检验。
2 结果
肝素钠稀释液在不同温度下放置不同时间后的内毒素污染情况见表1。
表1 肝素钠稀释液放置不同条件下的细菌内毒素污染情况
*：P<0.05，* *：P<0.01与12 h比较
4 讨论
由于细菌内毒素存在于G-菌的细胞壁(系脂多糖)，当菌体死亡崩解后游离出来［2］，达到或超过致热阈就会引起发热反应。本实验12、24h组抽液20次以内的肝素钠盐水稀释液分别置于4℃、25℃中，采样检测均无阳性结果，说明经过严格检查、正规无菌操作配制的肝素钠盐水稀释液24h内可安全使用。48 h组穿刺抽液20次与12h比较差异显著(P<0.05)，尽管穿刺抽液5、10次在48 h内出现的阳性结果无统计学差异，但均应引起重视。因为有细菌内毒素产生,就有引起发热反应的危险。穿刺次数越多，放置时间越长，针眼反复暴露于空气中，稀释液受细菌污染的机会就越大。4℃与25℃相比，结果无统计学差异，说明肝素钠盐水稀释液放置于4℃、25℃中与产生细菌内毒素无关，主要影响因素是反复穿刺抽液和放置时间过长。因此，肝素钠盐水稀释液放置于4℃、25℃条件下，使用期限以24h为宜。
(致谢：本实验得到本院护理部朱京慈主任、张亚莉同学的帮助，得到了医教部、药剂科的大力支持，并在洪新博士指导下完成数据统计,在此致以衷心感谢！)
作者简介：李 清(1965-),女,重庆市人,主管护师。电话:(023)68757724
参考文献：
［1］ 乙苏北，吴 刚，赵平渝，等. 乳癌化疗病人颈内静脉留置针封管时间的探讨［J］.中华护理杂志，1999，34（9）：554-555.
［2］ 陆德源 主编.医学微生物学［M］.第4版.北京：人民卫生出版社，1998.30.
由于细菌内毒素存在于G-菌的细胞壁(系脂多糖)，当菌体死亡崩解后游离出来［2］，达到或超过致热阈就会引起发热反应。本实验12、24h组抽液20次以内的肝素钠盐水稀释液分别置于4℃、25℃中，采样检测均无阳性结果，说明经过严格检查、正规无菌操作配制的肝素钠盐水稀释液24h内可安全使用。48 h组穿刺抽液20次与12h比较差异显著(P<0.05)，尽管穿刺抽液5、10次在48 h内出现的阳性结果无统计学差异，但均应引起重视。因为有细菌内毒素产生,就有引起发热反应的危险。穿刺次数越多，放置时间越长，针眼反复暴露于空气中，稀释液受细菌污染的机会就越大。4℃与25℃相比，结果无统计学差异，说明肝素钠盐水稀释液放置于4℃、25℃中与产生细菌内毒素无关，主要影响因素是反复穿刺抽液和放置时间过长。因此，肝素钠盐水稀释液放置于4℃、25℃条件下，使用期限以24h为宜。
(致谢：本实验得到本院护理部朱京慈主任、张亚莉同学的帮助，得到了医教部、药剂科的大力支持，并在洪新博士指导下完成数据统计,在此致以衷心感谢！)
作者简介：李 清(1965-),女,重庆市人,主管护师。电话:(023)68757724
参考文献：
［1］ 乙苏北，吴 刚，赵平渝，等. 乳癌化疗病人颈内静脉留置针封管时间的探讨［J］.中华护理杂志，1999，34（9）：554-555.
［2］ 陆德源 主编.医学微生物学［M］.第4版.北京：人民卫生出版社，1998.30.
第三军医大学学报 2000年第12期第22卷 经验与短篇
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