肝素钠盐水稀释液放置不同条件下细菌内毒素污染的调查

作者：李清　李涛　陈雅　李飞娥　刘道燕

关键词：肝素钠；等渗盐水；细菌内毒素

　　中图法分类号： R954　文献标识码： B     文章编号：1000-5404(2000)12-1185-01

　　随着静脉留置套管针在临床的广泛使用，采用肝素钠盐水稀释液封管已成为常规，其配制方法是将肝素钠12 500 U/支加入0.9％等渗盐水100 ml中，每次抽取2～5 ml（125 U/ml）^［1］封管。据调查，临床上少数科室由于每日只有3～5个病人封管，护理人员为了节约经费，将稀释液放置于冰箱中保存使用2～3 d或更长的时间。为了进一步探讨该稀释液使用中的安全性，本实验将肝素钠盐水稀释液配制后，通过不同的穿刺抽液次数、置于不同温度中，于不同的时间用鲎试剂法对细菌内毒素（热原）进行检测，现报告如下。

1　材料与方法

1．1　试剂与器材
　　鲎试剂(湛江海洋生物制品厂，0.5 U/支，批号991202)；鲎试剂溶解水(2ml/支，批号000110）；细菌内毒素工作标准品；肝素钠（上海生物化学制药厂，12 500 U/支批号001006）；等渗盐水100 ml（本院药剂科生产，批号000512）。电热恒温水浴箱，B-D 5 ml一次性空针（6号针头）。
1.2　方法
1．2.1样本分组及采样时间　　配制125 U/ml浓度的肝素钠盐水稀释液120瓶，根据采样时间不分为12、24、48、72 h 4组，每组30瓶。4组中再根据放置温度（4℃、25 ℃）分为2个亚组，每亚组各15瓶，以观察不同的温度对稀释液产生细菌内毒素的影响。亚组15瓶中再根据穿刺抽液次数不同分为3个观察组（5、10、20次组）各5瓶，以观察不同的抽液次数对产生细菌内毒素的影响。
1.2．2　细菌内毒素检测　　每瓶稀释液检测时，均取鲎试剂4支，分别用0.1 ml鲎试剂溶解水溶解，其中2支分别加入0.1 ml待测液作为试验管，另2支作阳性及阴性对照，阳性对照加内毒素工作标准品溶液0.1 ml，阴性对照加细菌内毒素检查用水0.1 ml。将试管溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入(37±1) ℃水浴箱中，保温(60±2) min，观察结果。
1.2．3　判断标准　　将试管从水浴箱中轻轻取出，缓缓倒转180 °时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性（＋）；凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性（－）。试验管两管均为（－），判定为无内毒素产生；如两管均为（＋），则判定为内毒素产生；如两管中1管为（－），1管为（＋），按上述方法另取4管复试，如4管中有1管为（＋），即判定为有内毒素产生。

1.3　统计学方法
　　采用χ²检验。

2　结果

　　肝素钠稀释液在不同温度下放置不同时间后的内毒素污染情况见表1。

表1　肝素钠稀释液放置不同条件下的细菌
内毒素污染情况

*：P<0.05，*　*：P<0.01与12 h比较

4　讨论

　　由于细菌内毒素存在于G^-菌的细胞壁(系脂多糖)，当菌体死亡崩解后游离出来^［2］，达到或超过致热阈就会引起发热反应。本实验12、24 h组抽液20次以内的肝素钠盐水稀释液分别置于4 ℃、25 ℃中，采样检测均无阳性结果，说明经过严格检查、正规无菌操作配制的肝素钠盐水稀释液24 h内可安全使用。48 h组穿刺抽液20次与12 h比较差异显著(P<0.05)，尽管穿刺抽液5、10次在48 h内出现的阳性结果无统计学差异，但均应引起重视。因为有细菌内毒素产生,就有引起发热反应的危险。穿刺次数越多，放置时间越长，针眼反复暴露于空气中，稀释液受细菌污染的机会就越大。4 ℃与25 ℃相比，结果无统计学差异，说明肝素钠盐水稀释液放置于4℃、25 ℃中与产生细菌内毒素无关，主要影响因素是反复穿刺抽液和放置时间过长。因此，肝素钠盐水稀释液放置于4 ℃、25 ℃条件下，使用期限以24 h为宜。
　　(致谢：本实验得到本院护理部朱京慈主任、张亚莉同学的帮助，得到了医教部、药剂科的大力支持，并在洪新博士指导下完成数据统计,在此致以衷心感谢！)

作者简介：李　清(1965-),女,重庆市人,主管护师。电话:(023)68757724

参考文献：

［1］　乙苏北，吴　刚，赵平渝，等. 乳癌化疗病人颈内静脉留置针封管时间的探讨［J］.中华护理杂志，1999，34（9）：554-555.
［2］　陆德源 主编.医学微生物学［M］.第4版.北京：人民卫生出版社，1998.30.

　

第三军医大学学报 2000年第12期第22卷 经验与短篇

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